配制每升培养基,应该在950 ml去离子水中加入:
胰化蛋白胨 10g
酵母提取物 5G
NaCl 5g
摇动容器直至溶质溶解.用5mol/LNaOH调pH至7.0.用去离子水定容至1L.在15psi高压下蒸汽灭菌20min。
PS:我记得在配固体培养基的时候每升加8~9克的琼脂,因为现在琼脂的质量都比较好,不需要加那么多。
LB培养基的配置~~~LB培养基
配制每升培养基,应该在950 ml去离子水中加入:
胰化蛋白胨 10g
酵母提取物 5g
NaCl 5g
摇动容器直至溶质溶解.用5mol/LNaOH调pH至7.0.用去离子水定容至1L.在15psi高压下蒸汽灭菌20min.
LB培养基出锅后待温度降到不太烫手时,加入过滤除菌的氨苄(过滤除菌用注射器加针头过滤器),摇匀培养基即可
如果加了琼脂粉的LB培养基一定要凝固前加氨苄 我做实验的时候大概55度,手能拿起来
lb固体培养基配方是什么LB一般被解释为Luria-Bertani培养基,其发明人为贝尔塔尼(Giuseppe Bertani),这个名字来源於英语的lysogeny broth,即溶菌肉汤。
LB培养基的配方如下:
胰蛋白胨(Tryptone) 10g/L
酵母提取物(Yeast extract) 5g/L
氯化钠(NaCl) 10g/L
琼脂粉15g/L
一定要在温度降下之前加好抗生素,并且倒好板。
LB固体培养基倒板
1.配制:100mlLB培养基加入1.5g琼脂粉
2.抗生素的加入:高压灭菌后,将融化的LB固体培养基置与55℃的水浴中,待培养基温度降到55℃时(手可触摸)加入抗生素,以免温度过高导致抗生素失效,并充分摇匀。
3.倒板:一般10ml倒1个板子。培养基倒入培养皿后,打开盖子,在紫外下照10-15分钟。
4.保存:用封口胶封边,并倒置放于4℃保存,一个月内使用。
“LB培养基”能不能吃?LB培养基的组分:蛋白胨、酵母膏,食盐。如果你用食品级的,当然可以吃。琼脂也可以吃。灭菌后也没有细菌,而且营养价值不错!琼脂我们小时候经常吃,比如软糖、果冻等;还有现在一些饮料,酸奶也会有琼脂。蛋白胨就是以前的牛肉汤嘛!或者是鱼汤嘛!蛋白水解物啊,都是氨基酸啊!买个氨基酸粉很贵的。酵母膏里面有葡聚糖,保健品嘛;有很多营养素啊;有蛋白质啊;酵母浸出物经常被用于调味品、酱油等,**酱油采用哦!很鲜,谷氨酸(不是谷氨酸钠味精哦)含量很高!
LB培养基如何配制?以配制一升培养基为例:
应该在950 ml去离子水中加入:
胰蛋白胨10g
酵母提取物5g
NaCl 10g
摇动容器直至溶质溶解。用5mol/LNaOH调pH至7.0,用去离子水定容至1L。在15psi高压下蒸汽灭菌21min。
扩展资料:
配置原则:
1、选择适宜的营养物质
就微生物主要类型而言,有细菌、放线菌、酵母菌、霉菌、原生动物、藻类及**之分,培养它们所需的培养基各不相同。
在实验室中常用牛肉膏蛋白胨培养基(或简称普通肉汤培养基)培养细菌,用高氏I号合成培养基培养放线菌,培养酵母菌一般用麦芽汁培养基,培养霉菌则一般用查氏合成培养基。
2、营养物质浓度及配比合适
培养基中营养物质浓度合适时微生物才能生长良好,营养物质浓度过低时不能满足微生物正常生长所需,浓度过高时则可能对微生物生长起抑制作用。
另外,培养基中各营养物质之间的浓度配比也直接影响微生物的生长繁殖和(或)代谢产物的形成和积累,其中碳氮比(C/N)的影响较大。严格地讲,碳氮比指培养基中碳元素与氮元素的物质的量比值,有时也指培养基中还原糖与粗蛋白之比。
3、控制pH条件
培养基的pH必须控制在一定的范围内,以满足不同类型微生物的生长繁殖或产生代谢产物。各类微生物生长繁殖或产生代谢产物的最适pH条件各不相同,一般来讲,细菌与放线菌适于在pH7-7.5范围内生长,酵母菌和霉菌通常在pH4.5-6范围内生长。
值得注意的是,在微生物生长繁殖和代谢过程中,由于营养物质被分解利用和代谢产物的形成与积累,会导致培养基pH发生变化,若不对培养基pH条件进行控制,往往导致微生物生长速度下降或(和)代谢产物产量下降。
4、控制氧化还原电位(redox potential)
不同类型微生物生长对氧化还原电位(F)的要求不一样,一般好氧性微生物在F值为+0.1V以上时可正常生长,一般以+0.3一+0.4V为宜,厌氧性微生物只能在F值低于+0.1V条件下生长,兼性厌氧微生物在F值为+0.1V以上时进行好氧呼吸,在+0.1V以下时进行发酵。
5、原料来源的选择
在配制培养基时应尽量利用廉价且易于获得的原料作为培养基成分,特别是在发酵工业中,培养基用量很大,利用低成本的原料更体现出其经济价值。
6、灭菌处理
要获得微生物纯培养,必须避免杂菌污染,因此对所用器材及工作场所进行消毒与灭菌。对培养基而言,更是要进行严格的灭菌。对培养基一般采取高压蒸汽灭菌,一般培养基用1.05kg/cm2,121.3℃条件下维持15-30min可达到灭菌目的。
在配制培养基过程中,泡沫的存在对灭菌处理极不利,因为泡沫中的空气形成隔热层,使泡沫中微生物难以被杀*。因而有时需要在培养基中加入消泡沫剂以减少泡沫的产生,或适当提高灭菌温度。
参考资料:百度百科-LB培养基
LB培养基配方是什么?LB培养基的配方如下:
胰蛋白胨(Tryptone) 10g/L;
酵母提取物(Yeast extract) 5g/L;
氯化钠(NaCl) 10g/L;
另外根据经验值用NaOH调节该培养基的pH,使其达到7.4,LB培养基是一种培养基的名称,生化分子实验中一般用该培养基来预培养菌种,使菌种成倍扩增,达到使用要求,可分为液体培养基和固体培养基。
LB培养基则
近年来用于培养基因工程受体菌(大肠杆菌)的常用培养基。两者都属于半合成培养基。肉膏蛋白胨的培养基主要成分是牛肉膏、蛋白胨和NaCl。而LB培养基的主要成分是胰蛋白胨、酵母提取物和NaCl。高氏合成一号培养基是一种用于培养放线菌的合成培养基。培养基中的可溶性淀粉作为碳源和能源。
以上内容参考:百度百科-LB培养基